Толстая капля полихром

ТОЛСТАЯ КАПЛЯ — метод обнаружения паразитов крови, а также выявления морфологических элементов крови. Предложен Р. Россом в 1903 г. для выявления возбудителей малярии (см.).

Метод толстой капли используется для выявления спирохет (см.), трипаносом (см.), микрофилярий (см. Филяриатозы). Он нашел широкое применение в мед. практике, т. к. позволяет за одно и то же время исследовать в 30—50 раз большее количество крови на наличие паразитов, чем в тонком мазке. Это обусловлено тем, что при использовании этого метода кровь не фиксируется и во время окраски происходит гемолиз эритроцитов, к-рые становятся прозрачными, а паразиты, находящиеся в них, после окраски хорошо видимыми. С помощью этого метода может быть подсчитано число паразитов на определенное количество лейкоцитов. Ввиду неравномерного распределения паразитов и лейкоцитов в различных участках приготовленного по этому методу препарата подсчет следует производить в центральных и периферических его участках и выводить среднее значение.

При постановке метода возможно выявление полихроматофилов (см. Полихромазия), эозинофилов, базофилов, эндотелия (при затяжном септическом эндокардите и сепсисе), метгемоглобиновых телец (телец Гейнца — Эрлиха).

Приготовление препарата по методу толстой капли: на предметное стекло наносят 2—3 капли крови, к-рые распределяют с помощью иглы или угла предметного стекла до величины пятнадцатикопеечной монеты. Другой метод приготовления препарата был предложен в 1925 г. Гуппенбауэром (Huppenbauer): на предметном стекле делают мазок крови и, пока он влажный, наносят на него каплю крови, к-рая равномерно растекается, образуя правильный круг. Преимущества этого метода — равномерность капли,исключение механического повреждения элементов крови при ее размазывании; в мазке сохраняется строма эритроцитов, что позволяет изучать форму н величину пораженных эритроцитов; капля не трескается, хорошо пристает к стеклу.

Капли крови на стекле высушивают на воздухе или в термостате и, не фиксируя, окрашивают, чаще по Романовскому (см. Романовского— Гимзы метод) при pH 7,2—7,3. Препарат рекомендуется окрашивать не позже чем через 2—3 сут. после приготовления. В препаратах, длительно сохранявшихся, особенно в условиях сухого жаркого климата, паразиты окрашиваются хуже, эритроциты плохо лизируются. На такие препараты с целью обеспечения гемолиза рекомендуется до окраски наливать на 3—5 мин. дистиллированную воду, к-рую затем заменяют красящим р-ром.

Рекомендованы методы ускоренной окраски препаратов метиленовой синькой и эозином. Препарат, приготовленный по методу толстой капли, может быть также окрашен (после гемолизирования) щелочной синькой Мансона, а также по методу И. Г. Иоффе метиленовой синькой с фуксином ii другими методами.

Библиогр.: Лабораторные методы исследования патогенных простейших, под ред. Д. Н. Засухина, с. 165, М., 1957; Справочник по клиническим лабораторным методам исследования, под ред. Е. А. Кост, М., 1975; Field J. W. The microscopic diagnosis of human malaria, v. 1—2, Kuala Lumpur, 1948—1956.

Читайте также:  Спермицидная смазка что это такое

Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:

  1. Демонстрационные препараты.
  2. Микроскоп.
  3. Иммерсионное масло.

Изучение плазмодиев – возбудителей трехдневной, четырехдневной и тропической малярии

С целью обнаружения плазмодиев малярии толстую каплю и мазки изучают с иммерсионной системой микроскопа. Малярийные плазмодии отыскивают в более тонкой части капли (по краю ее), где лучше сохраняется форма паразитов.

В сомнительных случаях изучение малярийных плазмодиев проводят в мазках крови. Паразиты, как правило, обнаруживаются в эритроцитах; их цитоплазма окрашивается в серовато-синий или голубой цвет, а ядро — в оттенки красного цвета.

Возбудитель трехдневной малярии – Plasmodium vivax (рис. 46а, 1 и 46б, 1). Мерозоит имеет овальную или круглую форму, размер его 1-2 ц. Он представляет собой ядро и комочек цитоплазмы.

Рис. 46а. Возбудители малярии человека в мазке крови. 1 – Plasmodium vivax, 2 – Plasmodium malarie, 3 – Plasmodium falciparum

Кольцевидный шизонт по виду напоминает перстень. Он имеет в центре вакуоль, окруженную ободком цитоплазмы, в наиболее тонком месте которой расположено маленькое ядро. Различают мелкие, средние и крупные кольцевидные шизонты.

Амебовидный шизонт имеет одно ядро и цитоплазму, окружающую в молодых шизонтах одну, а во взрослых несколько вакуолей. Имеющиеся в питоплазме паразита ложноножки придают ему причудливую форму. На полюсе, противоположном ядру, цитоплазма шизонта значительно шире и содержит коричневые зернышки пигмента. В участках эритроцитов, свободных от плазмодиев, выявляют обильную, мелкую красноватую зернистость Шюффнера.

Шизонт, подготавливающийся к делению, теряет вакуоли, принимает округлую форму с правильными ровными контурами, пигмент располагается диффузно, либо собирается в кучки, а ядро — ближе к периферии цитоплазмы паразита. Шизонт заполняет почти весь эритроцит, который увеличивается в размере. В свободном от паразита пространстве выявляется зернистость Шюффнера. В делящемся шизонте выявляют два и более ядер в необособленной цитоплазме.

Морула имеет от 14 до 22 мерозоитов, тесно прилегающих друг к другу, пигмент в ней собирается в одну кучку, реже — в две или остается рассеянным.

Женские гаметоциты (макрогаметоциты) крупнее мужских, имеют маленькое плотное ядро, располагающееся эксцентрично. Цитоплазма темно-голубого цвета, в которой равномерно рассеян обильный пигмент темно-коричневого цвета. Мужские гаметоциты (микрогаметоциты) имеют более крупное и рыхлое ядро, располагающееся центрально, в периферических участках цитоплазмы обнаруживается обильный пигмент коричневатого цвета. В свободных от паразита участках эритроцита выявляется зернистость Шюффнера.

Читайте также:  Как оттянуть климактерический период у женщин

Возбудитель четырехдневной малярии — Plasmodium malariae (рис. 46а, 2 и 46б, 2). Имеет те же формы развития, что и возбудитель трехдневной малярии. Встречаются как амебовидные, так и лентовидные формы шизонтов. Молодые формы лентовидных шпзонтов расположены поперек эритроцита в виде узкой полоски. Взрослые лентовидные шизонты находятся в виде ленты, ядро вытянуто в длину и расположено по краю ленты, шизонты занимают почти весь эритроцит. Пигмент сосредоточен на противоположной от ядра стороне.
Морула имеет 6-12 (чаше 8) мерозоитов; располагаются они в виде правильной розетки («маргаритки») вокруг кучки пигмента.

Рис. 46б. Возбудители малярии человека в толстой капле. 1 – Plasmodium vivax, 2 – Plasmodium malarie, 3 – Plasmodium falciparum

Половые формы развития (гаметоциты) округлые; они мельче гаметоцитов возбудителя трехдневной малярии. Возбудитель четырехдневной малярии имеет следую¬щие морфологические особенности: он меньше Plasmodium vivax; эритроциты с находящимися в них паразитами никогда не увеличиваются в размерах.

Возбудитель тропической малярии — Plasmodium рга-ecox falciparum (рис. 46а, 3 и 466, 3). Кольцевидные шизонты мелкие и имеют вид тонких ободков; они занимают 1/6 часть эритроцита.

Амебовидные шизонты имеют одну-две широкие ложноножки, пигмент располагается в одном месте в виде компактной кучки темно-коричневого цвета. Гаметоциты имеют характерную форму полулуния.

В середине возбудителя располагается ядро. Женские гаметоциты имеют компактное ядро, окруженное пигментом в виде зерен; цитоплазма окрашивается по Романовскому в синий цвет. У мужских гаметоцитов ядро более крупное и рыхлое, цитоплазма светло-голубого цвета, иногда виден ободок эритроцита. В крови больного обнаруживают кольца и гаметоциты раздельно или вместе. Эритроциты с находящимися в них плазмодиями не увеличены.

Обнаружение спирохет возвратного тифа в мазках крови и толстой капле

С целью обнаружения спирохет возвратного тифа препараты крови окрашивают по Романовскому или разведенным (1:4, 1:5) фуксином Циля. Чтобы окрасить мазки фуксином Циля, их фиксируют, наливают на 1-2 минуты разведенный фуксин Циля, сливают краску и смывают водой. Мазок высушивают и исследуют под микроскопом с иммерсией.

Спирохеты возвратного тифа (рис. 47) представляют собой штопорообразно извитые тонкие нити. По Романовскому окрашиваются в фиолетовый цвет, разведенным фуксином — в красный.

Рис. 47. Спирохета возвратного тифа в крови

Определение степени полихромазии в толстой капле

Степень полихромазии устанавливают в толстой капле, окрашенной по Романовскому. Препараты изучают с иммерсионной системой микроскопа. В нескольких полях зрения подсчитывают количество синевато-фполетовых сеточек (рис. 48). По количеству сеточек, содержащихся в каждом поле зрения, судят о степени полихромазии. Если при нормальном количестве эритроцитов в 1 мм3 крови насчитывают до 10 сеточек в поле зрения, то полихромазию обозначают одним полюсом (Р + ), при обнаружении до 20 сеточек ее обозначают двумя полюсами (Р++), при количестве сеточек до 30 — тремя полюсами (Р+ + +) и в случае большого количества сеточек — четырьмя плюсами (Р + + + +).

Читайте также:  Миома матки 6 недель что это значит

Рис. 48. Полихроматофилия и базофильная зернистость в толстой капле. а – сеточка остатки полихроматофилии эритроцитов

1) Оцените результат анализа мочи по Нечипоренко:

Пациент Петров Н.К., 40 лет

Первое терапевтическое отделение ОКБ

Лейкоциты 5 000

Эритроциты 10 000

1) Данный анализ свидетельствует о гематурии, что является следствием мочекаменной болезни или гломерулонефрита.

Задача № 37

1) Оцените результат представленного общего анализа крови.

АНАЛИЗ КРОВИ №__2___

В учреждение__ОКБ________Отделение_гематологическое для врача _Алексеевой_________

Эритроциты Гемоглобин Цветной показатель Толстая капля Ретику-лоциты Тромбоциты Паразиты
полихром базофилы
4,5-5,5х10 12 /л 132-164 м 115-145 ж 0,8-1,0 + 0,5-1,5 180-320 тысяч
2,1х10 12 /л 76 г/л 1,1 2,0
Лейкоциты Базо-филы Эозино-филы Нейтрофилы Лимфоциты Моно-циты Индекс сдвига
миелоц. юные палоч. сегмент.
Норма 4-8 тыс. 0-0,6% 3-4% 5% 62-67% 24-30% 6-8% 0,6
Норма в абс. 30-40 180-320 240-320 4020-5040 1800-2400
Числах 10,1х10 9 /л

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)___25_мм/час__ Конец _________________

Анализ проводил _Иванова______________________________________________

Дата «_3_»__02___________2005 г.

1) Признаки В12-дефицитной анемии, снижение уровня гемоглобина, эритроцитов, повышение цветового показателя (гиперхромия), ретикулоцитоз, изменение величины (анизоцитоз, макроцитоз) и формы (пойкилоцитоз) эритроцитов. Умеренный лейкоцитоз и повышение СОЭ.

Задача № 38

1) Проведите сравнительную характеристику анализа желудочного содержимого пациента натощак.

Норма Полученный результат
Количество 5-50 мл 105 мл
Общая кислотность не более 20-40 титр. единиц 55 единиц
Свободная соляная кислота до 20 титр. единиц 40 единиц
Пепсин 0-21 мг/% 40 мг/%

1) В представленном результате все показатели превышают норму: количество желудочного сока, общая кислотность, свободная соляная кислота, пепсин, гиперхлоргидрия, повышение уровня соляной кислоты. Результаты свидетельствуют о гиперсекреторной и гипермоторной функции желудка.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: При сдаче лабораторной работы, студент делает вид, что все знает; преподаватель делает вид, что верит ему. 9531 – | 7348 – или читать все.

91.146.8.87 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.

Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)

очень нужно

Adblock detector